제품 설명Thermostable FEN1은 Pyrococcus furiosus Fen1 유전자를 E. coli에서 발현시킨 재조합 단백질입니다. FEN1은 flap endonuclease 1의 줄임말이지만, endonuclease와 exonuclease 활성을 모두 가지고 있습니다. 5'-flap endonuclease 활성은 5' 쪽의 돌출된 flap 구조를 제거하여 5'-phosphate 말단을 생성합니다. 5'->3' exonuclease 활성은 nick이나 gap이 있는 이중가닥 DNA에 작용합니다. 이 열안정성을 가지는 DNA 절단 효소는 60-65°C에서 최적의 활성을 나타내며, Mg2+보다 Mn2+이 있을 때 더 높은 활성을 나타냅니다. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA)는 FEN1의 활성을 증가시킵니다.
제품 특징
- Reaction temperature: 65°C
제품 응용
- Cleavage of flap DNA structure
제품 구성품
- Thermostable FEN1
- 10X Thermostable FEN1 Reaction Buffer
- Sterile water
Unit 정의
One unit is defined as the amount of enzyme required to cleave 10 pmol of 5´ flap containing oligonucleotide substrate in a total reaction volume of 10 µl for 10 min at 65°C.
10X Thermostable FEN1 Reaction Buffer
200 mM Tris-HCl, 100 mM (NH4)2SO4, 100 mM KCl, 20 mM MgSO4, 1% Triton® X-100, pH 8.8 @ 25°C
Figure 1. Cleavage efficiency of FEN1 toward double-flap DNA substrate
Reaction mixtures with 15 fmol of flap DNA substrate were incubated for 15 min at 37˚C or 65˚C
