제품 설명
Thermostable RNase H는
Thermus thermophilus의 RNase H 유전자를
E. coli에서 발현시킨 재조합 단백질입니다. 이 효소는 단일, 혹은 이중가닥 RNA나 DNA가 아닌 RNA-DNA 하이브리드의 RNA 가닥을 5'-phosphate를 갖는 단일 뉴클레오타이드로 분해하며, 50°C 이상에서 최적의 활성을 나타냅니다.
제품 특징
- Reaction temperature: 50℃
- Heat inactivation: No
제품 응용
- RNA structure mapping and site-specific RNA cleavage requiring higher stringency
- Removing poly(A) tails from mRNA hybridized to oligo(dT)
- Removing mRNA during second strand cDNA synthesis
- Application to isothermal amplification methods
제품 구성품
- Thermostable RNase H
- 10X RNase H Buffer
- Sterile water (RNase free)
제품 품질 관리
- Purity: >95% on SDS-PAGE
- Endonuclease-free
- Exonuclease-free
- RNase-free
Unit의 정의
One unit is defined as the amount of enzyme required to produce 1 nmol of ribonucleotides from 40 pmol of a fluorescently labeled 25 base pair RNA:DNA hybrid in a total reaction volume of 50 µl in 20 minutes at 50°C.
Storage Buffer 조성
50 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, 0.1% Triton X-100, pH 7.5
10X RNase H Buffer 조성
500 mM Tris-HCl, 750 mM KCl, 30 mM MgCl2, 100 mM DTT, pH 8.3
주의 사항
- RNase H 반응 buffer는 MgCl2를 포함합니다. RNA : DNA 하이브리드 기질 및 다른 종류의 단일 가닥 RNA를 사용하여 고온에서 반응을 수행하는 경우, 단일 가닥 RNA의 금속 이온에 의해 매개되는 분해를 방지하기 위해 반응 시간과 온도를 낮추는 것이 좋습니다.
- Proteinase K 또는 과량의 EDTA를 처리함으로써 Thermostable RNase H 활성을 종료할 수 있습니다.
- 최적 반응 온도는> 65 ° C, 최대 95 ° C입니다. Thermostable RNase H는 37 ° C와 비교하여 65 ° C에서 3 ~ 4 배 더 활성을 나타냅니다.
