제품 설명Endonuclease VIII 제품은 endonuclease VIII 유전자를 E. coli에서 발현시킨 재조합 단백질입니다. Endonuclease로 명명되었지만 N-glycosylase 와 AP-lyase 활성을 모두 가지고 있습니다. 이 효소의 N-glycosylase 활성은 DNA의 손상된 염기를 감지하고 염기만을 제거하여 apurinic 혹은 apyrimidinic (AP) 부위를 생성합니다. 추가적으로 AP-lyase 활성으로 AP 부위 양쪽의 phosphodiester 결합을 절단하여 한 뉴클레오타이드 gap을 생성합니다. AP 부위의 절단된 glycosydic backbone 에는 각각 3'-phosphate와 5'-phosphate가 남게 됩니다. 이 효소는 티민 글리콜, 5,6-디하이드로우라실, 5,6-디하이드로티민과 같이 산화된 피리미딘을 선택적으로 제거하여 DNA base exicision repair 에서 필수적인 역할을 합니다.
제품 특징
- Isolated from a recombinant source
- Reaction temperature: 37℃
- Heat inactivation: 75℃ for 10 min
- Standard reaction: 1X Endonuclease VIII Reaction Buffer, Incubate at 37℃
제품 응용
- Studies of DNA damage and repair
- Single cell electrophoresis (comet assay)
- DNA structure research
- Alkaline unwinding
제품 구성품
- Endonuclease VIII
- 10X Endonuclease VIII Buffer
- Sterile water
Unit 정의
One unit is defined as the amount of enzyme required to cleave 1 pmol of a 34 mer oligonucleotide duplex containing a single AP site* in a total reaction volume of 10 µl in 1 hour at 37℃ in 1X Endonuclease VIII Reaction Buffer containing 10 pmol of fluorescently labeled oligonucleotide duplex.
(* An AP site is created by treating 10 pmol of a 34 mer oligonucleotide duplex containing a single uracil residue with 1 unit of Uracil-DNA Glycosylase (UDG) for 2 min at 37℃.)
Storage Buffer
10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 250 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol
10X Reaction Buffer
100 mM Tris-HCl (pH 8.0), 750 mM NaCl, 10 mM EDTA
Figure 1. Cleavage of DNA containing an AP site by Endonuclease VIII
20 pmol of 5’ end-labeled DNA substrates were incubated with Endonuclease VIII for 1 hr at 37℃. Reaction products were analyzed on 15% denaturing PAGE.
