제품 설명Exonuclease III는 exonuclease III 유전자를 E. coli에서 발현시킨 재조합 단백질입니다. 이 효소는 이중 가닥 DNA 특이적인 3'->5' exonuclease 로, nick, blunt end 또는 3개 이하의 짧은 3'- , 5'-overhang DNA의 3'-OH 말단부터 뉴클레오티드를 연속적으로 제거합니다. Exonuclease III가 DNA에 한번 결합할 때마다 제한된 수의 뉴클레오티드를 제거하며 점진적으로 DNA를 분해해 나갑니다. 효소의 활성은 부분적으로 DNA의 나선형 구조와 염기서열에 따라 차이가 있습니다 (C>A=T>G). 온도와 염의 농도, 효소와 DNA의 상대적인 비율이 활성에 영향을 주기 때문에, 개별 반응 조건의 최적화가 수행되어야 합니다.
제품 특징
- Molecular weight: 28 kDa
- Reaction temperature: 37℃
- Heat inactivation: 70℃ for 20 min
제품 응용
- Production of intermediates for site-directed mutagenesis
- Cloning of PCR products
- Preparation of strand-specific probes
- Preparation of single-stranded templates for dideoxynucleotide sequencing
제품 구성품
- Exonuclease III (E. coli)
- 10X Exonuclease III Buffer
- Sterile water
품질관리
- Purity: >99% on SDS-PAGE
- Endonuclease-free
Unit 정의
One unit is defined as the amount of enzyme required to produce 1 nmol of acid-soluble nucleotides from double-stranded DNA in 30 minutes at 37℃.
Storage Buffer
5 mM KPO4, 200 mM KCl, 5 mM β-ME, 0.05 mM EDTA, 200 μg/ml BSA, 50% Glycerol, pH 6.5 @ 25℃ Store at -20℃.
10X Exonuclease III Buffer
100 mM Bis-Tris-Propane-HCl, 100 mM MgCl2, 10 mM DTT pH 7.0
참고사항
- Exonuclease III 는Mg2+ chelator에 의해 활성이 저해됩니다.
- DTT와 같은 sulfhydryl compounds는 효소를 장기 보존 시 안정화시킵니다.
- Exonuclease III는 DNA가 존재하지 않는 조건에서 열에 의해 빠르게 불활성화 됩니다.
