TOPcloner™ XL TA Kit

제품명	Cat. No.	크기	농도	가격(원)	추가
TOPcloner™ XL TA Kit	EZ033S	10 rxn	-	210,000
TOPcloner™ XL TA Kit	EZ033M	20 rxn	-	378,000

이전상품 TOPcloner™ Blunt kit 다음 상품 TOPcloner™ TA core kit 확대보기

리뷰 0 위시 0

추천하기

상품간략정보 및 구매기능

TOPcloner™ XL TA Kit

상품 선택옵션 0 개, 추가옵션 0 개

제조사	EZ033S
원산지	10 rxn
브랜드	-
판매가격	210,000원
배송비결제	주문시 결제

TOPcloner™ XL TA Kit

수량 +0원

위시리스트

제품 설명

TOPcloner PCR Cloning Kit를 사용하여 PCR 산물을 제한효소 처리없이 vector에 바로 삽입할 수 있습니다. 5분 반응으로 높은 효율의 cloning 이 가능합니다. pTOP V2 vector의 insert 삽입 위치에는 숙주세포 독성유전자 cytochrome c-551를 암호화한 ccdB 유전자가 있어, insert가 vector 에 삽입된 클론만 생존할 수 있습니다. 따라서 Blue-white colony screening 을 하지 않고도 효율적인 cloning이 가능합니다. TOPcloner PCR Cloning Kit에는 competent cell을 포함하여 cloning에 필요한 모든 구성 요소가 들어있지만, Core Kit에는 pTOP V2 vector, 6X TOPcloner Buffer와 sterile water만 들어있습니다.

제품 특징

- Short reaction time (5 min)

- Highly efficient cloning

- Direct use of PCR products

제품 응용

- Fast and efficient cloning

- TOPcloner XL TA Kit for A-tailed PCR products over 3 kb

제품 구성품

Box 1

pTOP TA V2, 6X TOPcloner buffer, M13 reverse primer,

M13 forward primer Control insert, Control primers mix, Sterile water

Box 2

S.O.C. Media, DH5α chemical competent E.coli, pUC19 control DNA

Box 3

Buffer GB, Buffer NW, Buffer EB, Crystal Violet, 6XCrystal Violet Loading Buffer

Figure 1. A schematic map of pTOP TA V2 (3807 bp).

A molecule of topoisomerase (TOPO) is covalently coupled to each of the two 3 one-nt protruding ends (nt positions 294 and 295) of pTOP TA V2 (Cat.# EZ001 and EZ011). Therefore, pTOP TA V2 is ready to form a covalent bond when mixed with PCR products with one-nt 3 A overhang. The addition of one A to the duplex DNA ends is intrinsic to Taq DNA polymerase.

Figure 2. The result of colony PCR.

Large (10 kb) size of PCR product was cloned using TOPcloner™ XL TA Kit.

Certificates of analysis

Manual

Material Safety Data Sheet

긴 길이의 insert 를 cloning 할 때 유의할 점은 무엇입니까?

길이가 긴 insert 를 cloning 할 때, Insert DNA를 포함한 plasmid의 전체 길이가 큰 경우 (특히, 10 kb를 넘는 경우)에는 transformation 효율이 현저히 낮아지고, 대장균 내에서의 plasmid 안정성도 떨어지므로, 정확한 clone을 확보하기 어려워집니다. 또한, 손상되지 않은 긴 insert 를 얻기 어려워 cloning 효율이 저하됩니다.
당사는 긴 DNA 단편의 cloning 을 위한 TOPcloner™ XL TA Kit (Cat. EZ033S) 를 보유하고 있으며, 이 제품은 특별한 gel purification 시약이 제공되어 긴 길이의 PCR 산물을 효율적으로 cloning 할 수 있습니다.
nTaq-Tenuto 를 이용한 PCR 산물도 TA Cloning에 사용할 수 있나요?

Taq polmerase와 proofreading polymerase 를 포함하는 nTaq-Tenuto 도 3' A-overhang이 존재함으로 TA Cloning 이 가능합니다. 또한,Pfu polymerase만을 사용하는 경우에도 PCR 후 Taq polymerase로 3' A-overhang을 추가할 수 있습니다.
제한 효소로 절단된 DNA 를 TOPcloner™ kit 로 삽입할 수 있습니까?

TOPcloner™ kit 의 Topoisomerase 특성으로 인해 insert DNA 의 5' 에 phosphate 가 포함되어서는 안됩니다. 따라서 제한 효소로 절단된 DNA 는 TOPcloner™ kit 의 기질로 사용할 수 없습니다.

TOPcloner™ kit 와 TOPcloner™ core kit 의 차이는 무엇입니까?

TOPcloner™ kit 와 TOPcloner™ core kit 는 구성품이 다릅니다.

각 제품의 구성품은 아래와 같습니다.

TOPcloner™ TA kit

TOPcloner™ TA core kit

pTOP TA V2

6X TOPcloner™ Buffer

2X TOPsimple™ DyeMIX-Tenuto

M13F, M13R (10 pmol/μl)

Control insert DNA (20 ng/μl)

Control primers (10 pmol/μl each)

DH5α Chemically Competent E. coli

Sterile water

pTOP TA V2

6X TOPcloner™ Buffer

Sterile water

TOPcloner™ TA-Blunt kit 의 효율은 적합한 TOPcloner™ kit 를 사용할 때와 동일합니까?

최상의 반응을 위해서는 insert 형태에 따라 적절한 kit 사용을 권장합니다.

3’-A overhang insert DNA 는 TOPcloner™ TA kit 를, blunt end insert DNA 는 TOPcloner™ blunt kit 를 사용하시기 바랍니다. TOPcloner™ TA-Blunt kit 는 모든 경우에 대해 약 80% 의 효율을 얻을 수 있습니다.
TOPcloner™ cloning kit 에서 self-ligation 이 발생했습니다. 이유가 무엇입니까?

pTOP V2 vector 에는 ccdB gene 이 포함되어 self-ligation 시 colony가 사멸합니다.
다만, 제조 과정중에 vector 와 topoisomerase 가 목적한 위치에 정확하게 결합되지 않아서 ccdB gene 이 제대로 기능하지 못하는 경우가 일부 발생할 수 있습니다. 이 때문에 self-ligation 된 vector 를 포함하는 colony 가 생존하게 된다고 예측하고 있습니다. 그럼에도 불구하고, ㈜엔지노믹스는 positive control 대비 self-ligation 된 colony 비율을 2% 미만으로 관리하고 있습니다.
TOPcloner™ cloning kit 에 제공되는 vector 에는 T7 또는 T3 promoter 가 있습니까?

제공해 드리는 pTOP V2 Vector 안에는 T3, T7 Promoter 가 포함되어 있지 않습니다.

Products related to the selected product.

선택하신 상품이 장바구니에 담겼습니다.

계속구매 장바구니 이동