제품 설명TOPscript™ III Reverse Transcriptase는 M-MLV Reverse Transcriptase(Cat. RT001)와 함께 교정기능을 제공하는 개량형 제품입니다. 이 제품은 높은 열 안정성 (~50°C)과 최대 18kb까지 cDNA 합성이 가능합니다. 해당 제품은 Primer (oligo dT, random hexamer) 별도 구매가 필요 합니다.
제품 특징
- Thermostable and RNase H variant of M-MLV RTase
- Synthesize cDNA at 42℃~55℃.
- Especially the highest activity at 50℃
- Generate full-length transcripts up to 14 kb with the oligo(dT) primers.
- Increase accuracy during reverse transcription reactions.
- Efficiently synthesize cDNA by inhibiting the formation of secondary structure of RNA.
제품 응용
- Cloning genes of interest
- Sequencing transcriptomes
- Generating cDNA libraries with large and full-length inserts
- Generating gene expression analysis, like RNA splicing analysis.
제품 구성품
- TOPscript™ III Reverse Transcriptase (High fidelity)
- 10X TOPscript™ RT Buffer
- dNTP Mixture (2 mM each)
- Sterile water (RNase free)
Unit의 정의
One unit is the amount of enzyme required to incorporate 1 nmol dTTP into acid insoluble materials using 0.4 mM poly(rA)-oligo(dT) as substrate at 37℃ in 10 min.
Storage buffer
20 mM Tris-Cl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.01% TritonX-100, 55% glycerol
10X TOPscript™ RT Buffer
500 mM Tris-HCl (pH 8.3), 30 mM MgCl, 100 mM DTT, 750 mM KCl
주의 사항
TOPscript ™ 역전사효소는 42 ℃ -60 ℃의 넓은 범위에서 선택적으로 수행됩니다. 일반적으로 50 ℃를 권장합니다. 2 차 구조 및 기타 까다로운 표적을 포함하는 RNA의 경우, 성능 손실없이 합성 온도를 60 ℃로 할 수 있습니다.