제품 설명TOPscript™ II Reverse Transcriptase는 M-MLV Reverse Transcriptase(Cat. RT001)의 PCR 간섭을 획기적으로 줄인 개량형 제품입니다. 이 제품은 높은 열 안정성 (~55°C)과 RNase H 활성이 없는 제품으로 최대 14kb까지 cDNA 합성이 가능합니다. 해당 제품은 Primer (oligo dT, random hexamer) 별도 구매가 필요 합니다.
제품 특징
- Themostable and RNase H variant of M-MLV RTase (RTase H-)
- Synthesize cDNA at 42~55 ℃
- Especially the highest activity at 50 ℃
- Synthesis of long length cDNA (＜14 kb)
- Efficiently synthesize cDNA by inhibiting the formation of secondary structure of RNA
제품 응용
- First-strand cDNA synthesis
- RT-PCR
- Real-Time PCR
- Primer extension analysis
제품 구성품
- TOPscript™ II Reverse Transcriptase (RNase H-)
- 10X TOPscript™ RT Buffer
- dNTP Mixture (2 mM each)
- Sterile water (RNase free)
제품 품질 관리
- Purity: >99% on SDS-PAGE
- Endonuclease-free
- Exonuclease-free
- RNase-free
- Inhibitor-free
- Yield and length of cDNA product
Unit의 정의
One unit is the amount of enzyme required to incorporate 1 nmol dTTP into acid-insoluble materials using 0.4 mM poly(rA)-oligo(dT) as substrate at 37°C in 10 min.
Storage buffer
20 mM Tris-Cl (pH7.5), 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.01% TritonX-100, 55% glycerol
10X TOPscript™ RT Buffer
500 mM Tris-HCl (pH 8.3), 30 mM MgCl2, 100 mM DTT, 750 mM KCl
주의 사항
TOPscript ™ 역전사효소는 42 ℃ -60 ℃의 넓은 범위에서 선택적으로 수행됩니다. 일반적으로 50 ℃를 권장합니다. 2 차 구조 및 기타 까다로운 표적을 포함하는 RNA의 경우, 성능 손실없이 합성 온도를 60 ℃로 할 수 있습니다.
