㈜엔지노믹스의 FastCut buffer 는 대부분의 엔지노믹스 제한 효소와 함께 사용할 수 있습니다. 

따라서 double digestion 시 FastCut buffer 를 사용하면 쉽게 반응할 수 있습니다. 희석하지 않은 1 ㎕ 의 제한 효소를 FastCut buffer 와 함께 사용하여 15분 내에 1 μg 의 DNA 를 절단할 수 있습니다.

<FastCut buffer 적용 가능 여부>

㈜엔지노믹스의 FastCut Buffer 와 타 브랜드의 효소의 혼합 사용은 권장하지 않습니다 

1. Double digestion 에서 최적의 효소 활성을 보장하면서도 일부 효소의 star activity (비특이반응) 를 감소시기키 위해서는 적합한 buffer 를 선택하는 것이 중요합니다. 

각 효소는 최적의 EzBuffer가 제공되며, EzBuffer I~IV 에 따른 효소 활성 정보가 제공됩니다.

2. 각 효소가 최적의 활성을 나타내는 EzBuffer 를 선택하여 반응하시기 바랍니다. 

또한, ㈜엔지노믹스는 대부분의 제한효소와 호환되는 단일 버퍼시스템인 FastCut Buffer 를 제공하고 있습니다. FastCut Buffer 는 double digestion 반응에 사용할 수 있는 매우 편리한 buffer입니다.

3. 두 제한효소 모두에 대한 최적의 반응 buffer 를 찾기 어려울 경우, 대체 가능한 EZ-CleanCut™ 제한효소가 있는지 검토하십시오. 

EZ-CleanCut™ 제한효소는 모두 EzBuffer IV 에서 최적 활성을 나타냅니다.

4. start activity 를 최소화하기 위해서는 글리세롤의 최종 농도가 5% 미만이어야 합니다. 

따라서, 50 μl 반응에서 첨가되는 총 효소 양은 5 μl 를 초과하지 않도록 하십시오.

5. 두 제한효소의 권장 반응 온도가 다른 경우, 첫 번째 효소를 첨가하고 권장 온도에서 반응시킨 후 두 번째 효소를 추가하여 권장 온도에서 반응하십시오.

6. 모든 방법에도 불구하고, 함께 반응하기 어려운 경우에는 순차적 반응을 권장합니다. 

염 농도가 낮은 EzBuffer 에서 첫번째 제한효소를 반응하고 높은 염 농도의 buffer 를 추가하여 두번째 제한효소 반응을 수행하십시오.