cDNA는 -20°C에서 최대 1주일 동안 보관할 수 있습니다. 장기간 보관할 때는 -70°C에서 보관하는 것이 좋습니다.

 (최고 반응 온도는 RNA 2차 구조를 제거하는데 도움이 되지만, 더 많은 cDNA 합성을 보장하지는 않습니다.)​

TOPScript 또는 Superiorscript 역전사효소는 RNase H 활성이 저해되어 있기 때문에 RNA-cDNA hybrid 에서 RNA가 제거되지 않지만, 많은 경우 RNase H 처리 없이 PCR 이 가능하므로 RNase H 반응은 필수적이지 않습니다.

다만, 제거되지 않은 RNA는 PCR의 초기 denaturation이 잘 되지 않을 경우 PCR 효율을 감소시킬 수 있습니다. RNase H 반응을 생략하여 PCR 산물의 양이 적다고 판단되면, RNase H 처리 후 PCR을 수행해보시기 바랍니다.

Random primer(dN6)를 사용할 때 25°C 반응 단계를 진행하는 이유는 template에 대한 결합을 향상시키기 위한 것이므로 생략할 경우 효율이 감소할 수 있습니다.

42°C에서 반응하면 일부 RNA 2차 구조가 이완되어 M-MLV Reverse Transcriptase 가 더 긴 산물을 만들어낼 수 있습니다.

가능합니다.

SuperiorScript III 의 reaction buffer 에서 RNase H 반응이 가능하지만, 적정 사용량 결정을 위해 먼저, titration 실험을 해보시기를 권해드립니다.

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