A :

※ 아래의 제품의 사용방법은 일반적인 권장사항일 뿐입니다. 실험조건은 목적과 Sample에 따라 조정됩니다. 

 

1. End repair/dA-tailing 반응: EZ™ End Repair/dA-Tailing Module (EZ043) 

Fragmented DNA (~1μg)	x ㎕
10X ER/A-Tailing Reaction Buffer	5 ㎕
5X ER/A-Tailing Enzyme Mix	10 ㎕
Sterile water	Up to 50 ㎕

- Incubation at 20℃ for 30 min.

- Incubation at 65℃ for 30 min.

 

2. Adaptor ligation 반응: EZ™ Adaptor Ligation Module (EZ031)

End repair/dA-tailing 반응액	50 ㎕
5X Adaptor Ligation Reaction Buffer	20 ㎕
TOPspeed DNA Ligase	10 ㎕
Adaptor	x ㎕
Sterile water	Up to 100 ㎕

- Incubation at 20℃ for 15 min.​

 

3. DNA 정제 또는 size를 선택적으로 분리합니다. (-20 ℃에서 7일간 보관 가능합니다.) 

 

 

A : ※ 아래의 제품의 사용방법은 일반적인 권장사항일 뿐입니다. 실험조건은 목적과 Sample에 따라 조정됩니다.

Fragmented DNA (~1μg)	x ㎕
10X End Repair Reaction Buffer	10 ㎕
End Repair Enzyme Mix	5 ㎕
Sterile water	Up to 100 ㎕

- Incubation at 20℃ for 30 min.

 

2. Bead를 사용하여 DNA를 정제 또는 size를 선택적으로 분리합니다.

※ 중지가능 (-20 ℃에서 7일간 보관 가능합니다.) 

 

3. dA-tailng 반응: EZ™ dA-Tailing Module(EZ032)

Purified DNA	X ㎕
10X dA-Tailing Reaction Buffer	5 ㎕
Klenow DNA Polymerase, exo-	3 ㎕
Sterile water	Up to 50 ㎕

- Incubation at 37℃ for 30 min.

- Incubation at 70℃ for 5 min.

 

4. Adaptor ligation 반응: EZ™ Adaptor Ligation Module (EZ031) 

dA-tailng 반응액	50 ㎕
5X Adaptor Ligation Reaction Buffer	20 ㎕
TOPspeed DNA Ligase	10 ㎕
Adaptor	x ㎕
Sterile water	Up to 100 ㎕

- Incubation at 20℃ for 15 min. 

 

5. DNA 정제 또는 size를 선택적으로 분리합니다. (-20 ℃에서 7일간 보관 가능합니다.) 

 

A :

아래의 내용을 참고하시길 바랍니다.

 

1. Input DNA와 서열에 따라 정확한 측정 방법이 필요하며, sequencing reading을 조절 하시길 바랍니다.

2. Transposome의 활성을 억제하는 EDTA, salt 등과 같은 Chelate가 Input DNA에 첨가 되었는지 확인 바랍니다.​ 

A :

EZ-seq, EZ-Tera는 자체 제작한 Index 및 타사의 Index 모두 사용이 가능합니다. 

A :

EZ-seq, EZ-Tera 모두 Illumina 사의 기기와 호환이 가능합니다. 

A :

small genome, plasmid, microbial genome, PCR 제품 (> 300bp), gDNA 등과 같이 작은 크기의 DNA를 사용하여 라이브러리를 만드는 데 적합합니다. 

A :

EZ-Tera XT DNA library prep Kit는 소량의 DNA(1~20ng)로 라이브러리를 제작하기 위해 최적화되었습니다. 

최상의 결과를 얻기 위해 DNA를 정확하게 측정하고 TE 버퍼로 희석하여 준비하시길 권장드립니다. 

A :

EZ-seq Nano DNA Library Prep Kit는 insert 길이에 따라 필요한 양이 다르기 때문에 insert에 맞게 준비해 주시길 바랍니다.

 

* Genomic DNA를 Insert 길이에 따라 아래의 농도에 맞추어 준비하시길 바랍니다.

 - 350bp insert: 100 ng

 - 550bp insert: 200 ng

A :

EZ-Tera XT DNA Library Prep Kit는 Transposome으로 DNA tagmentation과정에서 DNA가 단편화됩니다.

따라서 Mechanical Fragmentation 된 DNA를 사용하게 되면 추가적인 단편화가 진행될 수 있어 권장하지 않습니다.

A :

EZ-Tera와 EZ-Seq는 NGS 준비하는 방식이 서로 다르기 때문에 index를 혼용하여 사용하는 것은 불가능합니다.

A :

​EZ-seq Single Index Kit 및 EZ-seq Nano DNA Library Prep Kit에 포함된 index는 methylation​ 되어 있습니다.​

A :

​EZ-Pure SPRI Bead Mix는 DNA 크기를 선택적으로 구분하거나 정화 단계에서 사용됩니다.

 

Enzynomics의 Next Generation Sequencing Kit는 일부 제품은 EZ-Pure SPRI Bead Mix​가 구성품으로 포함되어 있으니

구성품을 확인하시길 바랍니다.

 

- EZ-Tera XT DNA Library Prep Kit (Cat. EZ036): EZ-Pure SPRI Bead Mix​​ 미포함

- EZ-seq Nano DNA Library Prep Kit​ (Cat EZ034A, EZ034B): EZ-Pure SPRI Bead Mix​​ 포함

- EZ-seq RNA Library Prep Kit​ (EZ046): EZ-Pure SPRI Bead Mix​​ 포함​​

A :

NGS 라이브러리는 고품질의 DNA를 사용해야 하는 연구입니다. 추가 정제 단계 또는 여과/농축으로 고품질 DNA를 준비하시길 바랍니다.